关于GPC的几种叫法
有同学问高分子样品分析常用的色谱技术,有几种不太相同的名称,是否与不同的应用场合有关,究竟如何称谓较为合适,现回答如下:
高分子样品的分析常用的分析方法一般称为凝胶渗透色谱(GPC),最初这种色谱类型称为尺寸排阻色谱(Size exclusion chromatography, SEC),简称称凝胶色谱(gel chromatography),这种色谱技术是利用类似分子筛的固定相,该固定相具有化学惰性,对分析对象无吸附、分配和离子交换等作用,测试样品中的组分依据其分子大小和排阻能力的差异,实现被分离组分的分离。分离过程中分子量小的化合物可以进入固定相孔内,停留时间较长长;而大分子量的大体积化合物被阻止进入孔隙,但继续随流动相移动,且最先流出色谱柱。当洗脱液是水溶液或缓冲液时,称为凝胶过滤层析(GFC),也属于水相GPC,在生物界有更多的应用;当有机溶剂作为洗脱剂时,称为凝胶渗透色谱(GPC),在有机聚合物领域应用广泛。尺寸排阻色谱常用于分离组织提取物、多肽、蛋白质和核酸等聚合物,,也是高分子材料研究必备的分析设备。
凝胶过滤层析基于蛋白质分子量或分子形状的差异。当样品从柱的顶部向下移动时,大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒并被快速洗脱;而较小的蛋白质分子可以进入凝胶颗粒,进入凝胶的较小蛋白质的保留时间各不相同。分子量越大,洗脱时间越早,流出越快。
做有机高分子聚合物的分子量分布测定时,要用已知相对分子质量的单分散标准聚合物预先做一条淋洗体积或淋洗时间和相对分子质量对应的关系曲线,该线称为“校正曲线”。聚合物中几乎找不到单分散的标准样,一般用窄分布的试样代替。在相同的测试条件下,做一系列的GPC标准谱图,对应不同相对分子质量样品的保留时间,以lgM对t作图,所得曲线即为“校正曲线”。通过校正曲线,就能从GPC谱图上计算各种所需相对分子质量与相对分子质量分布的信息。聚合物中能够制得标准样的聚合物种类并不多,没有标准样的聚合物就不可能有校正曲线,使用GPC方法也不可能得到聚合物的相对分子质量和相对分子质量分布。